生物显微镜的使用(下)

(三)反射镜、费光器的使用方法和对光方法

1．调光

对采用反射镜的显微镜，一般都使用平面反射镜去反射太阳的散射光。只有在光线不足或窗外有干扰时，才使用凹面反射镜。采用电光源的显微镜，将光亮调合适即可c

2．聚光器的用法

(1)聚光器高度的调节。

一般的聚光镜．在平行光照射的情况下，其焦点落在它上端透镜平面中心上方约1.25mm线。当使用高倍镜或油镜时，内于放大率大，镜像亮度小，需要较强的照明。因此，应把聚光器升至最高，以便使聚光镜的焦点正好落在标本平面亡。侗在使用低倍物镜时，可将聚光器适当下降。

(2)可变光阑的用法。

可变光栏起两个作用。一是控制射向标本的光通量；二是改变聚光器的数值孔径。在这两个作用中，后者是主要的。为了使物镜的分辨率得到充分的利用，从原则上说，聚光器的数值孔径应与物镜的相同。否则，分辨率或清晰度会受影响。

3．对光方法

对电光源显微镜来说，使用时只要将光调节合适的亮度即可，不需要进行对光。但对使用自然光的低档显微镜来说，要想获得良好的观察效果，必须充分利用照明光线。因此，镜检之前应先对光。对光时，将低倍镜旋入光轴，聚光器适当升高，可变光阑开

至最大。然后，从目镜中观察，同时转动反射镜．直至视场最明亮、最清晰为止。如果利用自然光，则应尽量躲避窗框和窗外树枝的干扰。

(四)物镜的正确调焦

对光完成后或调节合适光亮后，升高镜简或降低载物台，将标本玻片夹在移动器即标本夹上，并将欲检查的部分移至载物台通光孔的中央，然后开始调焦。

无论作何种检查，均应从低倍镜开始。调焦时，先用粗动手轮将镜筒下降．使低倍镜的前透镜与盖玻片之间的距离略小于该物镜的丁作距离(5mm以下)。为了避免物镜压在标本玻片上，可从侧面窥视。然后，一边从目镜中观察视野，一边利用粗动手轮将镜筒徐徐上升，待初见物像后．改用微动手轮作精细调焦，直至物像最清晰为止。低倍物镜的视场大，有利于观察标本的全貌。也可利用移动器或纵、横向调节手轮寻觅所观察的目标。如有必要，可将寻得的目标移至视场的中心，为高倍镜观察做好准备。

从低倍物镜转换为高倍物镜时，如果物镜是显微镜的原配，所用的载玻片、盖玻片又符合标准，一般都可以进行“等高转换”。即转换后，只要稍微调节一下微调旋钮．即可看到清晰的图像。但油镜不强求齐焦，最好先将镜筒升高后再转换，最后按低倍镜的调焦方法重新调焦。

使用油镜的方法如下：先将镜筒升高，取下标本玻片，稍稍降低聚光器，并在聚光器的镜头上滴两滴香柏油(油小不应有气泡。如有，可用小木签扎破)，再将标本玻片放回原处，把聚光器升高，使载玻片的底面与香柏油接触。这样，就完成了聚光镜的伯浸。接着，在盖玻片上滴上1滴香柏油。然后从侧面窥视．利用粗调使镜筒尽量下降，直至油镜的前透镜浸没在香柏油中(但尚未接触玻片)。这样，又完成了物镜的油浸。然后，一边从臼镜中观察．一边利用微动手轮将镜筒缓缓上升(注意不要拧错了方向，压碎盖玻片)．直至视野中出现最清晰的物像为止。

聚光镜的油浸，还可以采用另一种滴油方法，即不直接把油滴在聚光器的镜头上，而是把载玻片翻过来，将油滴在载玻片的底面上，然后再翻过去，对准放置于聚光器上面，再使聚光器上升，来完成聚光器的油浸。这种方法虽然不那么顺手，但比较安全。有人使用玻璃棒直接与聚光镜接触来涂抹香柏油．这种方法容易划伤镜片，不宜采用。

在使用油镜时，允许在聚光镜与标本之间不加香柏油，即聚光镜上仍以空气为介质，但这会牺牲物镜的分辨率。

如用油镜观察后，又需要转回高信物镜观察，应将盖玻片上的油擦去，以免站污高倍物镜。但聚光器广的油可以石擦，只要把光阑适当缩小一点即可。

油镜使用完毕，要及时将香柏油擦拭干净。镜头上可先用干净的擦镜纸擦I—2次，把大部分的油擦掉。然后用二四苯滴湿的擦镜纸擦2次，最后用擦镜纸擦干净即可。聚光镜的擦拭方法与此相同。如标本需要保存，玻片上的香柏油可用“拉纸法”擦拭干净。即将擦镜纸覆盖在玻片上，在纸上滴上—滴二甲苯．趁湿将纸条平拖着拄外拉，连续几次即可擦干净。

在整个调焦过程中(尤其是高倍物镜和油镜的调焦)，每个动作都要缓慢进行。否则，物像一闪而过，找不到观察的目标。