基因敲除以及HPLC的问题
新手求助对基因敲除以及HPLC熟知的高手
我敲掉了一个基因，发现这种链霉菌还是产抗生素，现在的问题是：这个基因的敲除株与野生株对比之后虽然还是产抗生素，但不知道有没有量的变化，如果可以定量的话就可以分析一下，但现在不知道怎么定量？
我只是做了一个HPLC，发现在特定的保留时间下还是出峰了，不知道怎么定量所以只是看了一下有峰，初步判定还是产抗生素，但不是不知道可比可以定量分析
可以定量. 相同的条件, 如果峰面积相同, 则表达量没有变化. 对应的峰面积就代表产量.
看峰面积吧，要保证各种处理方法都相同的，不过感觉不是很准
从产物量上来比较，色谱峰面积可以定量，但是准确性不高，你要设置一个内参或是标准样，但整体比较难！我建议可以用RTPCR在相关基因表达水平上进行定量，发文章时肯定得有这方面的数据！
你做一个标准样品，比如购买一个它产生的抗生素，之后做一个标曲，再同样条件下，做你的野生株和突变株，就可以根据峰面积和响应值做定量 了
积分看峰面积吧 买标样 打标方 然后对比出峰时间 不是很准